国产偷国产偷精品高清尤物丨国产女精品视频网站免费蜜芽丨国产亚洲午夜高清国产拍精品丨又粗又猛又大爽又黄老大爷5丨人妻爽妇网一区二区三区

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網站!
誠信促進發展,實力鑄就品牌
服務熱線:

18102086003

產品分類

Product category

技術文章 / article 您的位置:網站首頁 > 技術文章 > 細胞凍存和復蘇常見問題!

細胞凍存和復蘇常見問題!

發布時間: 2023-12-05  點擊次數: 1570次

 

 

凍存細胞一般常用胎牛血清(FBS)和二甲基亞砜(DMSO)。血清是維持細胞生存環境;DMSO是冷凍保護劑,使細胞免受低溫冰晶形成、及滲透壓改變而導致的物理損傷;

細胞培養理論上基本建議的是兩種:70%培養基 + 10%DMSO+ 20%胎牛血清或者10%DMSO+ 90%胎牛血清 。

但經過有些實驗室經過對比發現:"10%的DMSO,90%的血清"復蘇效果相對比"70%培養基 + 10%DMSO+ 20%血清"好。

 

 

DMSO產品咱就不多說了,什么品牌都有,只要是選擇細胞培養級別的,效果應該差不多。不過我用的是MP Biomedicals二甲基亞砜(DMSO),效果還可以。

對于胎牛血清的選擇就要相對謹慎了,市面上胎牛血清品牌可以說是魚龍混雜,剛看過新聞的客戶就會知道,高仿產品橫行。慎重起見,給大家推薦CellMax品牌胎牛血清,目前有澳洲血清(庫存緊張)和中國血源胎牛血清可供大家試用,購買。

 

 

細胞凍存和復蘇需要注意哪些呢?

 

 

1、細胞本身的狀態

一般情況下細胞的復蘇還與原代細胞的活性有關,如果要凍存的細胞懸液本身活性不高的話,后面復蘇的存活率也不高。

 

2、凍存細胞數量要足夠

無論你再怎么小心,細胞在冷凍和復蘇的時候都是最脆弱的,總會死掉一批。所以,一開始就要保證凍存細胞的數量足夠。

 

3、慢凍快融

一般情況下,細胞凍存時要遵循“慢凍快融"的原則。標準的降溫速度是1-2℃/min ,當溫度到達-25℃,降溫速度可加快至5-10℃/min,到-80℃可直接入液氮。有些實驗室是梯度凍存:4度,-20,-80,液氮,依次凍存。而復蘇速度越快越好。從液氮罐里取出來之后,迅速放在37°C水浴中,盡快融化

 

4、注意安全

細胞凍存和復蘇是細胞培養技術里面最容易出事的部分。凡是和液氮接觸的操作,注意戴保護眼鏡和手套。注意:復蘇的時候,在水浴中搖搖動的時候會有爆炸的可能性。另外, DMSO是有毒致癌的。接觸的時候務必要帶好手套。

 

5、做好標記

對于凍存細胞,一定要做好標記。如:細胞名稱、代數和凍存日期。特別是公共實驗室,更要做好標記,避免找不到自己的細胞。

 

6、DMSO是否去除

由于DMSO是一種有毒致癌物質。那么,解凍之后,應不應該去除凍存液中的DMSO呢?答案是no。除了極少數特別注明的對DMSO敏感的細胞外,99%的細胞都不需要去除DMSO。后面細胞培養中頻繁換液會慢慢去除掉DMSO。

 

 




主站蜘蛛池模板: 荆州市| 图片| 土默特右旗| 广灵县| 互助| 沁阳市| 乐亭县| 开平市| 布尔津县| 特克斯县| 河北区| 北碚区| 定边县| 盐源县| 龙游县| 丹巴县| 团风县| 乡城县| 大同市| 乌兰县| 邳州市| 延安市| 西平县| 南岸区| 怀远县| 京山县| 江口县| 固始县| 榆中县| 泌阳县| 永春县| 玉树县| 滨州市| 昌乐县| 益阳市| 酉阳| 乌什县| 随州市| 柏乡县| 娱乐| 清徐县|